Запрошуємо до співпраці виконавців курсових та дипломних робіт на взаємовигідних умовах.

Культуры клеток и их условия выращивания (вирусология)

нейрогуморальних чинників, що діють в цілісному організмі.

Лише окремі клітки або групи кліток популяції на тлі дегенерації більшої частини клітинного пласта можуть зберегти здібність до зростання і розмноження. Ці клітки, виявивши потенцію нескінченного розмноження in vitro, при багатократних перевиваннях дають початок культурам кліток, що перевиваються.

Розрізняють лінії і штами кліток, що перевиваються. Першим терміном позначають клітки, що перевиваються, характеризуються потенційним безсмертям і, як правило, гетероплоїдним каріотипом другим терміном, — клітки, що напівперевиваються, з диплоїдним набором хромосом і обмеженою тривалістю життя in vitro. Поява і тих, і інших кліток пов'язано з процесом відбору в клітинній популяції первинних культур, що є, таким чином, джерелом всіх ліній і штамів кліток, що перевиваються.

Основна перевага ліній кліток, що перевиваються, в порівнянні з будь-якою первинною культурою, полягає в потенції необмеженого розмноження поза організмом і відносною автономністю що зближує їх з бактеріями і одноклітинними простими.

Здібність кліток, що перевиваються, до нескінченного розмноження in vitro знаменує собою якісний стрибок, в результаті якого клітки набувають здібності до автономного існування, подібно до мікроорганізмів, що вирощуються на штучних живильних середовищах. Сукупність змін, що приводять до появи у кліток таких особливостей, називають трансформацією, а клітки тканинних культур, що перевиваються, — трансформованими.

Удосконалення техніки культивування кліток значно розширило можливості отримання клітинних ліній, що перевивалися, з найрізноманітніших тканин тварин і людини. При цьому не була виявлена вікова межа, вище за яке тканини втрачали б здібність адаптації до необмеженого зростання in vitro, тобто до трансформації.

Іншим джерелом клітинних ліній, що перевиваються, є злоякісні новоутворення. В цьому випадку трансформація кліток відбувається in vivo в результаті розвитку патологічного процесу, етіологія якого багато в чому залишається ще невиясненою.

Не всі злоякісні новоутворення здатні давати початок клітинним культурам, що перевиваються

Так, наприклад, безуспішними були спроби отримати клітки, що перевивалися, з ракових пухлин шлунку і молочних залоз людини. Насилу вдається адаптувати до життя in vitro клітки плоскоклітинної раки шкіри і слизових оболонок. З іншого боку, порівняно легко виводяться лінії з тканин сарком і злоякісних пухлин нервової системи.

Особливу категорію клітинних культур складають штами, що напівперевиваються, мають диплоїдний набір хромосом. Вони вигідно поєднують в собі риси первинних кліток, що перевиваються.

2. ОТРИМАННЯ КЛІТИННИХ КУЛЬТУР ПРИГОТУВАННЯ ПЕРВИННИХ КЛІТИННИХ КУЛЬТУР.

 Первинною - називається культура, отримана з тканини і вирощувана in vitro до початку субкультивування, тобто до першого посіву. Первинна культура позбавлена багатьох кліток, присутніх в початковій тканині, оскільки не всі клітки здатні прикріплятися до субстрата і вижити in vitro. В процесі культивування кліток відбувається відносне збіднення культури такими, що не діляться або поволі діляться клітками.

На першому етапі отримання первинної культури проводять стерильне видалення фрагмента тканини, органу тварини і його механічну або ферментативну дезагрегацію. Тканина подрібнюється до шматочків об'ємом до 1 - 3 мм, шматочки тканини відмиваються від еритроцитів розчином Хенкса з антибіотиками. Для дезагрегації тканині використовують трипсин (0,25% неочищений або 0,01 - 0,05% очищений) або коллагеназу (200 - 2000 ед/мл, неочищена) і інші протеолітичні ферменти. Такий спосіб отримання

1 2 3 4 5 6 7 8 9

Похожие работы

Рефераты

Курсовые

Дипломные